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HLE-B3細胞ATCC CRL-11421

價格:2500元

聯系方式:I47-825O-882O

買家導航

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421標準細胞株基本信息

細胞名稱: HLE-B3細胞, ATCC CRL-11421細胞, HLEB3細胞, 人晶狀體上皮細胞
細胞又名: B-3; HLE B-3; HLEB-3; HLEB3; HLEC-B3
細胞來源: ATCC
產品貨號: CRL-11421
種屬來源:
組織來源:
患者年齡: 5-12個月
患者性別:
細胞描述: 該細胞系來源于一個5-12個月大的早產兒,在24小時內從患者病變視網膜上獲得人晶狀體。在60%融合處,3代細胞被Ad12-SV40感染。
抗原表達: SV40 T抗原
基因表達: β和γ晶體蛋白
細胞形態: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培養基: EMEM培養基,80%;FBS,20%。
存儲人: M Romsdahl
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
傳代方法: 1:2至1:3,每周2次。
凍存條件: 95% 完全培養基+5% DMSO,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
安全等級: 2
應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
STR:
Amelogenin X,Y
CSF1PO 11
D5S818 9,11
D7S820 11
D13S317 11
D16S539 11,12
TH01 9.3
TPOX 8
vWA 14,19
細胞說明: 免疫印跡法檢測細胞合成β和γ晶體蛋白。
細胞在培養中可保持76倍以上的增殖能力而不降低。
參考文獻:
1.Wang-Su S.-T., McCormack A.L., Yang S., Hosler M.R., Mixon A., Riviere M.A., Wilmarth P.A., Andley U.P., Garland D., Li H., David L.L., Wagner B.J.
Proteome analysis of lens epithelia, fibers, and the HLE B-3 cell line.
Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 44:4829-4836(2003)
 
2.Andley U.P., Fleming T.P.
Immortalized epithelial cell lines.
Patent number US5643782, 01-Jul-1997
 
3.Andley U.P., Rhim J.S., Chylack L.T. Jr., Fleming T.P.
Propagation and immortalization of human lens epithelial cells in culture.
Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 35:3094-3102(1994)

 

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421人晶狀體上皮細胞接受后處理

1)  收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請 拍照片發給我們。
 
2)  請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口 膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
 
3)  棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的 完全培養基。
 
4)  如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代, 傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
 
5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現 污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
 

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421人晶狀體上皮細胞培養操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液 加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
 
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
 
     1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
 
     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消 化。
     
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清 液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
 
     4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
 
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
 
      1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
 
      2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血 清和 DMSO ,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
 
     3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存 管位置以便下次拿取。

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421人晶狀體上皮細胞培養注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及時和我們聯系。
 
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子等,確保細胞培 養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
 
3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落,將細 胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證 實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確 認后我們為您再免費寄送一次。
 
4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯合度  80% 左右時正常傳代。
 
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以一定比例和客戶 自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
 
6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部溝通交流。由 于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問 題解決。
 
7. 該細胞僅供科研使用。



細胞培養相關試劑

血清 細胞培養基 其他細胞試劑
南美血清:Gibco BI Gemini
北美血清:ATCC
澳洲血清: Gibco
ES專用血清: ATCC Gibco
EMEM培養基: ATCC
DMEM培養基: ATCC  Gibco
RIPI1640培養基: ATCC  Gibco
L-15培養基: ATCC
F-12K培養基: ATCC
DMEM/F12培養基: ATCC
a-MEM培養基: Gibco
IMDM培養基: ATCC

 
青鏈霉素雙抗:
ATCC 30-2300
Gibco 15140-122
Hyclone SV30010

細胞轉染試劑:
Invitrogen Lipo 2000
Invitrogen Lipo 3000

凍存液
Sigma細胞培養級DMSO
無血清細胞凍存液

胰酶細胞消化液
ATCC 30-2101
Gibco 25200-056
Hyclone SH30042.01

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421標準細胞株說明書pdf版和相關資料下載

HLE-B3細胞ATCC CRL-11421標準細胞株應用舉例

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